2015年同等学力西医综合分子生物学

　　1.蛋白质磷酸化及去磷酸化

　　蛋白质的磷酸化是指由蛋白质激酶催化的把ATP或GTP上γ位的磷酸基转移到底物蛋白质氨基酸残基上的过程，其逆转过程是由蛋白质磷酸酶催化的，称为蛋白质脱磷酸化。

　　蛋白质磷酸化通常发生在含羟基的氨基酸残基，主要是丝氨酸，苏氨酸，酪氨酸。

　　2.蛋白质的分子结构及生物活性

　　一级结构 二级结构 三级结构 四级结构

　　定义 蛋白质分子中从N-C端的氨基酸序列 某一段肽链的局部主链空间结构 在二级结构基础上单个多肽链进一步折叠 两个以上的亚基之间的空间排布和相互作用。

　　表现形式 肽链 a-螺旋、β-折叠、β-转角、无规卷曲 结构域、分子伴侣 亚基

　　维系键 肽键、二硫键 氢键 疏水键、盐键、氢键、Van der Waals力 氢键、离子键

　　蛋白质变性：是蛋白质在受到光照、热、有机溶剂以及一些变性剂的作用时，次级键遭到破坏导致天然构象的破坏，其特定的空间构象被改变，但其一级结构不发生改变。

　　蛋白质复性：如果变性条件剧烈持久，蛋白质的变性是不可逆的。如果变性条件不剧烈，这种变性作用是可逆的，说明蛋白质分子内部结构的变化不大。这时，如果除去变性因素，在适当条件下变性蛋白质可恢复其天然构象和生物活性，这种现象称为蛋白质复性。例如胃蛋白酶加热至80～90℃时，失去溶解性，也无消化蛋白质的能力，如将温度再降低到37℃，则又可恢复溶解性和消化蛋白质的能力。

　　3.真核RNA聚合酶、原核RNA聚合酶、启动子、增强子等的作用。

　　均是参与转录活动，非复制。

　　1)增强子是增强基因启动子工作效率的顺式作用序列，基因的转录作用将会加强。

　　2)启动子是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列，是控制转录的起始时间和表达的程度。启动子就像“开关”，决定基因的活动。

　　#原核生物的RNA聚合酶：

　　亚基功能

　　a 决定哪些基因被转录

　　β 与转录全过程有关

　　β’ 结合DNA模板

　　の 辨认起始点

　　#真核生物的RNA聚合酶:

　　种类 Ⅰ Ⅱ Ⅲ

　　转录产物 45S-rRNA hnRNA 5S-rRNA、tRNA、snRNA

　　对鹅膏覃碱的反应 耐受 极敏感 中度敏感

　　细胞内定位 核仁 核质 核质

　　#真核生物RNA聚合酶Ⅱ最大亚基的羧基末端有一段共有序列是Tyr-Ser-Pro-Thr-Ser-Pro-Ser的重复序列片段，称为羧基末端结构域。所有的真核生物RNA聚合酶Ⅱ都有CTD，只是7个氨基酸共有序列的重复程度不同。CTD对维持细胞的活性是必需的。

　　4.遗传物质的碱基组成、DNA的组成

　　碱基共有5种：胞嘧啶(缩写作C)、鸟嘌呤(G)、腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T，DNA专有)和尿嘧啶(U，RNA专有)。

　　核酸有核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)两种。

　　组成DNA(脱氧核糖核酸)的基本单位——脱氧核苷酸

　　组成RNA(核糖核酸)的基本单位——核苷酸

　　组成多糖的基本单位——单糖

　　组成蛋白质的基本单位——氨基酸

　　脂肪是甘油和三分子脂肪酸合成的甘油三酯。

　　5.酶活性调节的三种方式：

　　1)酶原激活：酶原向酶转化的过程，一定条件下酶前体水解开特定的肽键致使构象改变而表现出酶的活性的过程，实际上是酶活性中心形成或暴露的过程。采用蛋白酶解方式激活的是胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、羧基肽酶、弹性蛋白酶等。

　　2)变构调节：体内一些代谢产物可与某些酶分子活性中心以外部位可逆结合，使酶发生变构并改变其催化活性，这种调节方式为变构调节。采用别构调节方式激活的是天冬氨酸转氨甲酰酶(ATCase)。

　　3)共价修饰：酶蛋白肽链上一些基团可与某种化学集团发生可逆的共价结合从而改变酶活性的过程。

　　6.真核生物转录过程中的剪接及GU-AG规则(2011年、2012年各考了一道题)

　　剪接的过程就是真核生物基因转录过程中对mRNA前体进行的加工方式，是按照GU-AG规则进行的。GU-AG规则是指真核生物转录生成初级RNA转录物，RNA 内含子序列5’端的起始两个核苷酸总是5’-GU-3’，并且其3’端的最后两个核苷酸总是5’-AG-3’，5’-GU-3’和5’-AG-3’称为剪接接口，剪接后，能除去初级mRNA上的内含子，把外显子连接为成熟的mRNA。

　　7.真核生物DNA聚合酶、原核生物DNA聚合酶的作用(2011年考2道题、2012年考1题)

　　原核细胞有3种DNA聚合酶，分别是DNA聚合酶I、 DNA聚合酶II、 DNA聚合酶III。

　　DNA聚合酶I：切除引物，对复制中的错误进行较读，对复制和修复中出现的空隙进行填补。

　　DNA聚合酶II：参与DNA损伤的应急状态修复(SOS修复)。

　　DNA聚合酶III：催化原核生物的复制延长。

　　I II III

　　5’-3’核酸外切酶活性 + — —

　　3’-5’核酸外切酶活性 + + +

　　5’-3’核酸聚合酶活性 + + +

　　(3’-5’核酸外切酶活性：能辨认错配的碱基对，并切除，具有校正功能。5’-3’核酸外切酶活性：能切除突变的DNA片段。)

　　8.真核细胞有5种DNA聚合酶，分别为DNA聚合酶α，β，γ，δ，ε。

　　DNA聚合酶α具有引物酶活性，合成引物，起始引发作用。

　　DNA聚合酶β损伤修复功能。

　　DNA聚合酶γ参与线粒体复制。

　　DNA聚合酶δ对真核生物的复制延长起催化作用，类似于原核生物的聚合酶III。

　　DNA聚合酶ε起校对、修复和填补空隙作用，相当于原核生物的聚合酶I。

　　α β γ δ ε

　　5’-3’核酸外切酶活性 + + + + +

　　3’-5’核酸外切酶活性 — — + + +

　　核酶：具有催化活性的RNA。

　　9.逆转录

　　逆转录是以RNA为模板合成DNA的过程，过程是逆转录酶以dNTP为底物，以RNA为模板，tRNA(主要是色氨酸tRNA)为引物，在tRNA的3′-H末端上，按5′→3′方向，合成一条与RNA模板互补的DNA单链，这条DNA单链叫做互补DNA(cDNA)，它与RNA模板形成RNA-DNA杂交体。随后又在反转录酶的作用下，水解掉RNA链，再以cDNA为模板合成第二条DNA链。完成由RNA指导的DNA合成过程。

　　10.转录因子

　　转录因子是真核基因转录起始所必需的非RNA聚合酶本身组分的蛋白质。(不是RNA聚合酶的亚基。)

　　在真核细胞中与RNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ相应的转录因子分别称为TFⅠ、TFⅡ、TFⅢ，不同基因由不同的上游启动子元件组成，能与不同的转录因子结合。(不同的RNA聚合酶有不同的相应的转录因子。)

本文选自新东方在线论坛。